科罗索酸通过干扰HER2/HER3异源二聚体抑制结直肠癌细胞生长
科罗索酸（Corosolicacid，CRA）是一种乌苏烷型五环三萜化合物，许多文献表明其具有降血糖、抗炎、抗肿瘤等作用。HER2和HER3是人类酪氨酸激酶受体表皮受体家族(RTKs)的两个成员，它们形成的异源二聚体被认为是是最强有力的信号复合体，因此，在多种癌症中都被证明是关键治疗靶点。本篇文献主要就是聚焦于CRA通过影响HER2/HER3异源二聚体的形成，来抑制结直肠癌的进展。
首先，作者采取了抗体微阵列技术，对加入CRA后的磷酸化RTK家族成员的表达变化进行考察。在结直肠癌HCT以及SW两个细胞系中，ALK，HER2，Axl蛋白均有显著性变化。接下来作者采用WB进行验证，结果发现仅有p-HER2有显著性变化。于是，作者将目光聚焦于HER家族。采用BLI技术，对HER家族四个成员进行考察，结果显示，除了HER1，其他三个成员与CRA均有结合，且HER3的结合最为有力。下面，作者也通过co-ip技术，PLA技术，证明了CRA影响了HER2和HER3异源二聚体的结合。
接下来，由于PI3K/Akt/PKA通路和RalA/RalBP1/CDK1通路是HER2/HER3的下游通路，因此作者考察了它们的表达情况，结果发现均有显著变化。于是作者敲除HER2，再来考察通路的变化，发现与CRA处理后的结果相似。
由于CDK1可以影响Drp1磷酸化位点Ser来促进线粒体分裂，于是下一步作者通过考察加入CRA后Drp1的两个磷酸化形式的表达，Drp1的异位情况，线粒体长度来考察CRA是否能够抑制线粒体分裂。同时作者也敲除HER2和HER3，发现结果与CRA处理的结果相似，均抑制了线粒体的分裂。
由于线粒体裂变与凋亡相关，于是作者下一步证明了CRA可以诱导结肠癌细胞发生凋亡。当敲除Drp1后，细胞凋亡比例下降，但若同时加入CRA，凋亡细胞比例下降趋势被部分逆转。
最后的部分，作者采取了异位瘤模型以及原位炎症诱导模型，来考察CRA的药效。结果显示，各指标均与体外结果一致。也就是说，CRA在体内和体外均具有较好的效果。
思路总结图
小结
本篇文献的图表非常清晰美观，并且在每一部分均绘制了总结图，便于读者的理解。全文逻辑严谨，方法较为丰富，新颖。并且在动物实验中，除了采取异位荷瘤，也使用了原位诱导结肠癌的模型，更加有说服力。
知识卡片
#01
HER2/HER3异源二聚体
人表皮生长因子受体家族由四个同源性表皮生长因子的受体HER1，HER2，HER3，和HER4组成，他们结构相似，均由胞外配体结合域、单一的跨膜区及胞质蛋白酪氨酸激酶结构域三个部分构成。受体二聚化是HER家族活化的主要方式，HER2没有特异性的配体，需要一个带有异源信号的合作伙伴，而HER3因其受体激酶活性受损，HER3的同源二聚体不具有信号传导功能，由NRG诱导的HER2/HER3异源二聚体是最强有力的信号复合体。
#02
BLI——生物膜光干涉技术
原理：当生物分子结合到传感器表面就形成了一层生物膜，生物膜对透过传感器的光的波形造成干涉现象。干涉现象以相位移动的方式被检测，从而可以检测结合到传感器分子数量的变化。
优势：可以获取生物分子相互作用的高质量的数据；直接作用的检测方式，可免去标记和信号放大步骤；实时监控可以对相互作用进行动力学分析；良好的反应特异性，即使在粗样品中；适用于非常广泛的不同物质分子。
#03
PLA——邻位连接技术
PLA技术即ProximityLigationAssay，译为邻位连接技术，该技术采用抗体-核酸复合物作为邻位连接探针。当一对邻位探针同时识别同一个目标蛋白分子时，它们将在空间位置上相互临近，通过连接反应形成一段可扩增的DNA序列。该序列能够反映待测蛋白的种类及浓度。该技术将对蛋白质的检测转变为对DNA核酸序列的检测，实现了对蛋白质的检测、定量及定位。其检测灵敏度是酶联免疫吸附法(ELISA)的倍。另一种情况下，两个抗体分别结合2个具有相互作用的目的蛋白。此时，邻位连接探针也相互靠近。加入一段互补序列，可与探针上的DNA链互补，在连接酶的作用下形成可作为模板的环状DNA分子。然后进行滚环复制。再与荧光标记的DNA短序列结合，便能直接观测到相互作用的两个蛋白质分子在细胞中的定位在。一般来说，一对PLA探针足够接近40nm时会产生PLA信号，PLA信号的位置直接反映了蛋白表达量或蛋白复合体的亚细胞定位。
指导教师：姚国栋